实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)是一项以PCR反应为基础的DNA定量技术,通过对目标基因在扩增过程中产生的拷贝数进行实时的定量,从而达到对目的基因的定性和定量分析。常用的对PCR产物进行荧光定量检测的方法有两种:一种是利用荧光染料与双链DNA结合,通过荧光强度进行定量;另一种是利用携带了荧光报告基团的特异DNA探针对目标基因进行定量。
技术优势
1.实验过程透明,结果真实可靠。
2.丰富的qPCR实验操作经验,确保您在极短的时间里得到真实可靠的实验结果。
3.强大的技术支持团队,为您的科研道路保驾护航。
服务流程
1.样品RNA的抽提。
2.RNA质量检测。
3.样品cDNA合成。
4.梯度稀释的标准品及待测样品的管家基因(β-actin)实时定量PCR。
5.制备用于绘制梯度稀释标准曲线的DNA模板。
6.待测样品的待测基因实时定量PCR。
7.实时定量PCR使用引物列表。
8.电泳。
9.数据分析及报告交付。
样品要求
1.细胞样品:收集细胞后放入液氮中速冻保存或速东24h后转入-80℃冰箱保存;收集细胞后,视细胞量,直接加入1~1.5mL Trizol溶解裂解细胞,再转入-80℃冰箱保存。
2.组织样品:动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存,液氮冻存24h后可转入-80℃冰箱保存;组织样品同样可以采用Trizol溶解裂解后放入-80℃冰箱保存。特殊组织(植物等)建议采用新鲜组织即刻提取RNA,逆转合成cDNA后-20℃保存备用。所有样品的处理和保存过程中,切总反复冻融。
注:样品运输条件:样品运输条件根据实验样品的处理条件,可以选择液氮或者干冰运输。
发货内容
1.荧光定量所有原始结果(包括RNA浓度及纯度检测数据,qPCR原始数据,扩增曲线及熔解曲线图)。
2.详细的实验报告(包括实验原理,实验方法,仪器,试剂,引物或探针序列,数据分析结果等)。