产品参数:
检测仪器 | 酶标仪 | 检测波长 | 450nm |
主要检测设备及配套 | 酶标仪; 高精度移液器及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL; 37℃恒温箱 | 需自备试剂 | 蒸馏水或去离子水; 吸水纸; 加样槽 |
预计测定时间 | 1.5h | 信号响应 | 递增 |
检测方法 | 双抗夹心法 | 运输条件 | 低温 |
备注:
板内变异系数小于10%;板间变异系数小于15%;回收率:85%-115%
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法。将目标抗体包被于酶标板上,分别向微孔中加入标准品和样本,其中的目标抗原与包被抗体结合,然后加入辣根过氧化物酶标记的抗体特异性的结合形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中的浓度。
产品标准注意事项:
■本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。
■试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按生物试验室安全防护条例执行。
■刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按照上述表格中保存条件存放。
■检测使用的酶标仪需要安装能检测450±10nm波长的滤光片,光密度范围在0-3.5之间。建议使用时提前15min预热。
■请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。
■试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,严禁混用。
■请勿使用过期的试剂。
实验注意事项:
■收集血液的试管应为一次性无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品。
■样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3-6个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。
■试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围,建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或者过低,请对样本做适当的稀释或者浓缩。
■若所检样本不在说明书所列样本之中,建议做预实验验证其检测有效性。
■若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液,由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。
■某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。