产品参数:
检测仪器 | 酶标仪 | 检测波长 | 340 nm |
主要检测设备及配套 | 酶标仪/96 孔UV板 | 信号响应 | 递减型 |
预计测定时间 | 2h (100 Sample) | 需自备试剂 | 无 |
检测方法 | NADH速率法 | 运输条件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
检测原理:
PEPCK能够催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶进一步催化磷酸烯醇式丙酮酸生成丙酮酸,再通过乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,NADH在340 nm处具有特征吸收峰,通过测定NADH消耗速率即可表征PEPCK的活性。
产品标准注意事项:
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
实验注意事项:
①若A1测定小于1或?A测定大于0.6时(96孔UV板A1测定小于0.6或?A测定大于0.4时),建议将粗酶液适当稀释后再进行测定,以提高检测灵敏,计算时相应修改;
②空白组为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下变化不超过0.06;
③准确在10 s和70 s时完成检测,若使用96孔UV板进行检测,应使用多道移液器且分批进行检测,以确保组间反应时间一致;
注:为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。