产品参数:
检测仪器 | 紫外分光光度计 | 检测波长 | 340 nm |
主要检测设备及配套 | 紫外分光光度计/1 mL石英比色皿(d=10 mm) | 信号响应 | 递减型 |
预计测定时间 | 5h (50 Sample) | 需自备试剂 | 无 |
检测方法 | NADH速率法 | 运输条件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
检测原理:
丙酮酸羧化酶可催化丙酮酸生成草酰乙酸,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,NADH在340 nm处具有特征吸收峰,通过测定NADH的氧化速率即可表征丙酮酸羧化酶的活性。
产品标准注意事项:
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
实验注意事项:
①若△A大于0.8,建议将粗酶液使用提取液适当稀释后再进行测定;若△A小于0.01时,可适当延长反应时间(5 min或10 min)后再进行测定,计算时相应修改;
②空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下变化不超过0.05;
③样品蛋白浓度需自行测定,由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约10 mg/mL),测定蛋白浓度时需扣除提取液自身蛋白浓度;
注:为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。