产品参数:
检测仪器 | 紫外分光光度计 | 检测波长 | 340 nm |
主要检测设备及配套 | 紫外分光光度计/1 mL石英比色皿(d=10 mm) | 信号响应 | 递减型 |
预计测定时间 | 10h (50 Sample) | 需自备试剂 | 无 |
检测方法 | NADH速率法 | 运输条件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
检测原理:
磷酸果糖激酶催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖二磷酸和ADP,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶依次催化NADH氧化生成NAD+,NADH在340 nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的下降速率即可表征磷酸果糖激酶的活性。
产品标准注意事项:
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
实验注意事项:
①测定过程中试剂三、试剂四和样本需冰上放置,以免失活;
②反应过程中应保持37℃或25℃恒温,建议在烧杯中装入适量37℃或25℃蒸馏水,将此烧杯放入37℃或25℃恒温水浴中,在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中;
③准确在20 s和620 s处完成读数,以保证实验结果的准确性;
④不同匀浆组织中磷酸果糖激酶活力不一样,若△A>0.5,则说明活力过高,建议使用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液(计算式中乘以相应稀释倍数),或缩短反应时间至120 s或300 s,使△A