产品参数:
检测仪器 | 紫外分光光度计 | 检测波长 | 340 nm |
主要检测设备及配套 | 紫外分光光度计/1 mL石英比色皿(d=10 mm) | 信号响应 | 递减型 |
预计测定时间 | 7h (50 Samples) | 需自备试剂 | 无 |
检测方法 | NADH速率法 | 运输条件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
检测原理:
丙酮酸激酶可催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,NADH在340 nm处具有特征吸收峰,通过测定吸光值的下降速率即可表征丙酮酸激酶的活性。
产品标准注意事项:
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
实验注意事项:
①测定过程中试剂二和粗酶液均需在冰上放置,以免变性和失活;
②准确在20 s和140 s处完成测定,以保证实验结果的准确性;
③若△A大于0.6,建议将粗酶液使用提取液适当稀释后再进行测定;若△A小于0.05,建议增加样本量重新制备粗酶液后再进行测定,计算时相应修改;
注:为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。