产品参数:
检测仪器 | 紫外分光光度计 | 检测波长 | 340 nm |
主要检测设备及配套 | 紫外分光光度计/1 mL 石英比色皿(d=10 mm) | 信号响应 | 递增型 |
预计测定时间 | 3h (50 Samples) | 需自备试剂 | 无 |
检测方法 | NADH速率法 | 运输条件 | -20℃ Dry Ice Transportation |
检测原理:
α-酮戊二酸脱氢酶催化α-酮戊二酸、NAD+和CoA生成琥珀酰CoA、CO2和NADH,NADH在340 nm具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可测定NADH的生成速率,进而表征α-KGDH的活性。
产品标准注意事项:
①测定过程中所有试剂和待测样本均需在冰上放置,以免变性和失活;
②比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃,可以取烧杯装入一定量37℃或25℃的蒸馏水,将烧杯放入37℃或25℃恒温水浴中,在反应过程中将比色皿连同反应液放在此烧杯中;
③准确在0 s和120 s处完成读数,以保证实验结果的准确性;
④∆A测定应在0.01-0.25之间,若∆A测定大于0.25,需将样本进行稀释后再进行测定;
⑤提取液中含有一定浓度的蛋白(约1 mg/mL),测定样品蛋白浓度时需减去提取液的蛋白含量;
实验注意事项:
注:为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。